本发明公开了一种番茄灰霉病菌LAMP检测引物、检测试剂盒及其应用。其外侧引物对为F3/B3、内侧引物对为FIP/BIP;试剂盒包括LAMP反应混合液、1对外侧引物F3/B3、1对外侧引物FIP/BIP、8 U Bst聚合酶和核酸染料1000×SYBR Green I。通过待测样品DNA 提取、环介导等温扩增、显色检测等三步即可检测到是否感染番茄灰霉病菌。本发明根据番茄灰霉病菌ITS序列设计引物,采用LAMP 技术进行检测,特异性强、灵敏度高,具有快速、准确性高、灵敏性好、现场应用方便等优点,解决了现有技术中存在的周期长、灵敏度较低、成本高、现场应用困难等缺陷,在番茄灰霉病菌检测方面潜力巨大。