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一种针对人TNF-α分子的自体疫苗的构建方法
- 专利权人:
- 中国人民解放军第四军医大学
- 发明人:
- 张英起,万一,薛晓畅,王增禄,赵宁
- 申请号：
- CN201110303946.1
- 公开号：
- CN102370979B
- 申请日:
- 2011.10.10
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种体内诱导出针对人TNF-α分子的自身抗体的蛋白疫苗的构建方法，采用分步克隆方法构建hTNF-TT830-844，hTNF-HEL46-61，hTNF-PADRE的融合基因，并通过在天然人TNF基因中引入点突变(T439→A、C440→G)优化mRNA二级结构，融合基因克隆入pET22b原核表达载体，在大肠杆菌BL21菌株中获得高效表达。通过计算机辅助分析在hTNF的表位肽结构域之间引入三种T辅助细胞表位肽与hTNF-α融合而克服机体对于自体蛋白的免疫耐受，使得机体发生高水平的体液免疫反应，产生的高水平hTNF-α中和性多克隆抗体在体外可以中和hTNF-α对L929细胞的杀伤活性；其中hTNF-PADRE的免疫原性最强，在不使用免疫佐剂的情况下即可诱发高水平的抗体，该疫苗对于II型胶原诱导的类风湿性关节炎、LPS诱导的恶病质等小鼠模型具有良好的保护和治疗作用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
