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表达PEDV的M+N双基因的真核表达载体
- 专利权人:
- 福建省农业科学院畜牧兽医研究所
- 发明人:
- 王隆柏,周伦江,吴学敏,陈秋勇,王晨燕,车勇良,刘玉涛
- 申请号：
- CN201710581141.0
- 公开号：
- CN107164408A
- 申请日:
- 2017.07.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 宋连梅
- 摘要：
- 本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种表达PEDV的M+N双基因的真核表达载体。通过PEDV的M和N基因片段，利用Blunt‑M2表达载体，通过无缝克隆技术，构建出表达PEDV的M+N双基因的真核表达载体，并在工程细胞中表达M+N双基因融合蛋白。本发明是直接将纯化PEDV的M基因片段连接到Blunt‑M2哺乳动物真核表达载体中，不需要连接至单克隆载体PMD19‑T中，然后M+Blunt‑M2质粒通过同源重组技术，无缝拼接N基因片段，从而获得M+N双基因融合表达载体，其质粒通过PCR技术进行鉴定，测序准确后再转染在细胞中获得成功表达。因此，该真核表达载体的制备比较其他真核表达技术，具有操作步骤简单、反应时间短等特点，适合双基因融合蛋白表达。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
