本发明公开了一种用于弓形虫感染预防的核苷酸序列,其含有选自以下的核苷酸序列:1)SEQ ID NO.1所示的弓形虫表面抗原SAG1的核苷酸序列,和/或SEQ ID NO.2所示弓形虫微线体蛋白MIC3的核苷酸序列,和/或SEQ ID NO.3所示棒状体蛋白ROP2的核苷酸序列;2)与1)中核苷酸序列互补的核苷酸序列;3)对上述1)或2)所示的核苷酸序列进行一个或多个碱基的取代、缺失或添加修饰的核苷酸序列。此外,本发明还公开了包括上述核苷酸序列的DNA鸡尾酒疫苗和应用。经ELISA试验验证,本发明的鸡尾酒疫苗具有良好的免疫原性,免疫接种后能在体内高效、正确表达并能诱发机体产生较强的体液免疫反应。