一种TLR4基因缺失斑马鱼模型
- 专利权人:
- 广州博识生物科技有限公司
- 发明人:
- 袭细毛
- 申请号:
- CN202110488818.2
- 公开号:
- CN113249385A
- 申请日:
- 2021.04.30
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2021
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及一种TLR4基因缺失斑马鱼的构建,具体步骤包括CRISPR/Cas9基因敲除靶位点设计;构建sgRNA体外转录载体;sgRNA体外转录、纯化及鉴定;制备Cas9 mRNA;筛选最高突变效率的sgRNA,用于获得F0胚胎,所述sgRNA序列为5’‑GCCTCTAACGATATAGATGA‑3’;将F0胚胎饲养至性成熟;与野生型成鱼外交,筛选F0;选取可产生有效突变的F0自交,筛选F1;从F1代突变体中挑选相同突变的雌鱼和雄鱼,杂交得到F2代;本发明构建的TLR4基因缺失斑马鱼可稳定遗传,TLR4基因缺失斑马鱼可用于研究TLR4基因与炎症和肿瘤的关系。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心