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利用重组慢病毒诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的方法
- 专利权人:
- 南通大学
- 发明人:
- 谭雪锋,金国华,秦建兵
- 申请号：
- CN201310229277.7
- 公开号：
- CN103865956B
- 申请日:
- 2013.06.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 龙涛
- 摘要：
- 本发明涉及一种生物工程技术，具体地说是一种利用基因重组病毒诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的方法：重组慢病毒载体构建；神经干细胞的分离、培养及鉴定；重组病毒转染NSCs；重组慢病毒转染NSCs的鉴定；重组病毒转染NSCs：取传代3次后的NSCs消化制备成单细胞悬液，接种至培养板中；转染TH+Brn4基因重组慢病毒；加入慢病毒和ploybrene，摇晃混匀后将培养板置培养箱中培养，12小时后更换新鲜分化培养基；同时用嘌呤霉素进行筛选，以获得稳定转染的细胞；本发明的优点在于：通过构建目的基因TH和Brn4的慢病毒载体，转染NSCs后外源性基因能在细胞内稳定表达；分化后产生高比例的TH阳性多巴胺能神经元；Brn4能促进神经营养因子的高表达，且具有抑制细胞凋亡的功能。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
