PAPST LICENSING GmbH & Co. KG; 78112; St. Georgen; DE
发明人:
Meier, Hans Jörg, Dr., 78467, Konstanz, DE,Hofer, Hans Werner, Prof. Dr.med., 78464, Konstanz, DE
申请号：
DE102010025970
公开号：
DE102010025970A1
申请日:
2010.07.02
申请国别(地区):
DE
年份:
2012
代理人:
摘要：
Verfahren zur Bestimmung einer Protease in einer biologischen Probe, insbesondere wenn neben der Proform der Protease auch die Protease selbst, und wenigstens ein zu der Protease korrespondierender Proteaseinhibitor vorliegt, mit den Stufen: a) Umwandlung der Proform der Protease in die aktive Protease, b) der so gebildeten Protease in der Messprobe wird der Proteaseinhibitor entzogen, indem man die Messprobe mit einem Trägermaterial in Kontakt bringt, an welchem eine Inhibitorbindesubstanz kovalent oder adsorptiv gebunden ist, die eine höhere Affinität (Bindungsstärke) zu dem Proteaseinhibitor besitzt als die Protease selbst, c) das Trägermaterial mit daran gebundenem Proteaseinhibitor wird von der Messprobe separiert, wobei der Messprobe ein Substrat für die wenigstens eine Protease, deren Aktivität zu bestimmen ist, zugegeben und die proteolytische Umsetzung des Substrats durch die Protease erfasst wird.A method for determining a protease in a biological sample, in particular if, in addition to the proform of the protease also the protease itself, and at least one to the protease of the corresponding protease inhibitor is present, including the steps of:a) conversion of the proform of the protease in the active protease,b) of the thus formed protease in the measuring sample is removed from the protease inhibitor by subjecting the sample to be brought into contact with a carrier material, to which an inhibitor binder substance adsorptively bound covalently or 2, which is a higher affinity (binding strength) to the protease inhibitor has as the protease itself,c) the carrier material with the bound protease inhibitor is separated from the measuring sample, wherein the measuring sample a substrate for the at least one protease, whose activity is to be determined, are added and the proteolytic conversion of the substrate is detected by the protease.
