本发明属于生物技术领域,涉及一种抗体及抗体的开发和生产,具体涉及一种抗小鼠RCN3蛋白单克隆ScFv抗体噬菌体文库及其淘选方法。所述单克隆ScFv抗体的碱基序列如SEQ ID NO:10所示,所述碱基序列对应的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示。本发明公开了一种对小鼠RCN3蛋白有很高的亲和力,在噬菌体表面展示的,可用于高效筛选的抗体噬菌体文库的构建及其淘选方法和抗体的序列及真核表达与抗原检测的方法;本发明的淘选方法可以淘选得到特异性识别并结合小鼠RCN3蛋白分子的ScFv抗体,所述抗体文库构建及其淘选方法对筛选出来的抗体对RCN3蛋白相关的检测与疾病防治具有广泛的应用前景。