More particularly, the present invention relates to a method for separating a precursor-derived precursor cell from a gland tissue by dissolving a tissue sample collected from a human gland tissue into a three-dimensional spheroid cell culture, . In addition, the present invention provides a method for culturing precursor cells of a precursor cell line or an intact smooth muscle cell line by culturing the cells in a micropatterned nanofiber scaffold and culturing the precursor cells in a 3-dimensional spheroid culture. More specifically, on a scaffold composed of a nanofiber-based microdomain on which spheroids are formed and a hydrogel-based microdomain on which no cell adherence occurs, a line that forms a three-dimensional spheroid- And more particularly, to a method for isolating and culturing excellent stem cell clusters having enhanced function by culturing cells, preferably salivary stem cells. The advantage of the method is that it enables the isolation and large-scale homogenization of precursor cells with excellent function without the usual two-dimensional cell separation and culture step.본 발명은 3차원 스페로이드 배양을 통한 기능 강화 선조직 유래 선줄기세포의 분리 방법에 관한 것으로, 상세하게는 인간 선(gland) 조직에서 채취한 조직 샘플을 용해 후 3차원 스페로이드 세포배양을 통해 선줄기세포를 분리하는 방법이다. 또한, 본 발명은 분리된 선줄기세포 또는 선조직 혼합 세포주를 마이크로패턴화 된 나노섬유 스케폴드에서 배양하여, 3차원 스페로이드 배양을 통한 기능 강화된 선줄기세포 배양 방법을 제공한다. 더욱 구체적으로는, 스페로이드가 형성되는 나노섬유 기반의 마이크로 영역과 세포의 부착이 일어나지 않는 하이드로젤 기반의 마이크로 영역으로 구성된 스케폴드 상에서 직경 200μm 크기의 3차원 스페로이드 형태의 세포 클러스터를 형성하는 선 세포, 바람직하게는 타액선줄기세포를 배양함으로써, 기능이 강화된 우수한 줄기세포 클러스터를 분리하고 배양해내는 방법에 관한 것이다. 장점은 일반적인 2차원적 세포 분리 및 배양 단계를 거치지 않고 기능이 우수한 선줄기세포의 분리 및 대량 균등 배양을 가능하게 하는 방법에 대한 것이다.