绿色荧光蛋白纳米抗体的编码基因及其制备方法和应用

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专利权人:

中山大学

发明人:

容益康,裘建香,李凯丽

申请号：

CN201810400122.8

公开号：

CN108753792A

申请日:

2018.04.28

申请国别(地区):

中国

年份:

2018

代理人:

张芬

摘要：

本发明涉及四个绿色荧光蛋白(GFP)纳米抗体编码基因，及其制备方法和应用。本发明构建了GFP纳米抗体文库。利用噬菌体展示技术，从该抗体文库中筛选到了四个特异结合GFP的纳米抗体，分别命名为A12、E6、D5和B9。测序获得了这四个纳米抗体基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示，其对应的氨基酸序列如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示。将A12基因克隆到改造的表达载体pADL‑10b‑His中，并导入SS320菌株中；将E6、D5和B9基因分别克隆到改造的表达载体pBAD24‑Flag‑His中，并分别导入TOP10菌株中，从而获得了四个纳米抗体的原核表达载体和菌株。本发明表达纯化了四个纳米抗体并证明了四个GFP纳米抗体能够特异结合GFP，可应用于基础研究中对GFP的检测。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/