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抗EGFR单克隆抗体生物学活性检测方法
- 专利权人:
- 佛山安普泽生物医药股份有限公司
- 发明人:
- 贺炜华,王笑非,梁桂婵
- 申请号:
- CN201410840995.2
- 公开号:
- CN104535767B
- 申请日:
- 2014.12.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 李国钊`刘婉
- 摘要:
- 本发明提供了一种抗EGFR单克隆抗体生物学活性检测方法,其步骤包括:1)A431细胞复苏、传代;2)准备96孔板单层A431细胞;3)样品和rhEGF的稀释;4)将样品的7个稀释梯度加入到铺有A431细胞的96孔板,加入rhEGF;培养;5)加入甲醛固定;TBS洗板2次;加入TritonX-100,孵育;TBS洗板1次;加入H2O2,孵育;TBS洗板1次;加入locking buffer,孵育;6)加入一抗稀释液;孵育过夜;弃去一抗稀释液,TBST洗板4次;加入二抗稀释液,避光孵育;弃去二抗稀释液,TBST洗板3次;7)加入TMB,避光孵育;加入H2SO4,终止显色;8)A450nm和A650nm下读数。本发明的方法能够有效、精确地检测抗EGFR单克隆抗体的生物学活性。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/