本发明公开了一种真菌抗肿瘤多肽核苷酸序列的制备方法和应用。该分离多肽的编码序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其步骤是，首先是提取杨树菇的总RNA为模板，通过RT-PCR得到cDNA第一链为模板，通过PCR扩增，得到PCR产物；其次是酶切得到PCR产物和原核表达载体，构建重组表达载体；第三是将得到的重组表达载体转化大肠杆菌宿主细胞，得到表达杨树菇小类泛素修饰因子的重组细胞；第四是将得到的重组细胞诱导培养过夜获得饱和培养物；等五是利用Ni2+亲和层析法纯化蛋白，分离，纯化在重组细胞中表达的多肽。多肽作为制备治疗或预防肿瘤疾病药中的应用。涉及的蛋白质具有抗肿瘤活性。在开发抗肿瘤药物方面有很大的应用价值。
