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克隆有鲑鱼降钙素基因的变铅青链霉菌的构建方法
- 专利权人:
- 中国医学科学院医药生物技术研究所
- 发明人:
- 李元,洪斌,李嗣英,陈松森,刘伯英,郭强,王醒,郭连宏,高萍
- 申请号：
- CN96105118.3
- 公开号：
- CN1062598C
- 申请日:
- 1996.05.16
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2001
- 代理人:
- 刘新宇
- 摘要：
- 本发明涉及克隆有鲑鱼降钙素（ＳＣＴ）基因的变铅青链霉菌的构建方法。本发明采用基因工程技术，以质粒ＰIJ680为载体。其中包括采用ＰＣＲ（多聚酶反应）扩增技术，分别扩增获得鲑鱼降钙素（ＳＣＴ)基因和分泌信号肽melc1基因；通过T4DNA连接酶将ＳＣＴ基因、melc1、基因和PUC19质粒ＤＮＡ连接，转化至大肠杆菌制备获得ＳＣＴ－melc1ＤＮＡ片段；该片段与链霉菌载体质粒PIJ680连接后，通过转化使其克隆至变铅青链霉菌ＴＫ５４，挑选抗硫链丝菌素的转化子，提取重组质粒，得到重组质粒PMS680，获得了克隆有鲑鱼降钙素基因的变铅青链霉菌ＴＫ５４－ＭＳ６８０，（含有重组质粒PMS680），将该克隆菌株进行发酵培养，即可获得高效分泌表达的鲑鱼降钙素，本工程菌遗传性稳定。$#!
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
