The present invention relates to a method for preparing a variant lipolytic enzyme comprising expressing in a host organism a nucleotide sequence which has at least 90% identity with a nucleotide sequence encoding a fungal lipolytic enzyme and comprises at least one modification at a position which corresponds in the encoded amino acid sequence to a) the introduction of at least one glycosylation site in the amino acid sequence compared with the original fungal lipolytic enzyme； b) the introduction of at least one amino acid at a surface position and at a location in an external loop distal to the active site of the enzyme which is more hydrophilic； or c) a substitution or insertion at one or more of positions disclosed herein or a deletion at one or more positions disclosed herein. The invention also relates to polypeptide produced by the method and to novel nucleic acids.본 발명은 진균성 지질 분해 효소를 인코딩하는 뉴클레오타이드 서열과 적어도 90%의 동일성을 갖는 뉴클레오타이드 서열을 숙주 생물체에서 발현하는 것을 포함하고 인코딩된 아미노산 서열에서 하기와 상응하는 위치에서의 적어도 하나의 변형을 포함하는 변이 지질 분해 효소의 제조 방법에 관한 것으로, 상기 변형은 a) 원시 진균성 지질 분해 효소와 비교하여 아미노산 서열에서 하나 이상의 글리코실화 부위의 도입(또는 추가적인 글리코실화 부위)； b) 친수성이 더욱 강한(원시 아미노산과 비교하여) 효소의 활성 부위(촉매 트라이어드)의 외부 고리 말단의 위치 및 폴리펩타이드의 표면 위치에서 적어도 하나의 아미노산의 도입； 또는 c) 위치 33, 63, 78, 190, 305, 306 또는 320의 하나 이상의 위치에서의 치환 또는 삽입, 또는 위치 311-312 또는 307-319의 하나 이상의 위치에서의 삭제, 이때 각각의 아미노산 위치는 서열 번호 2의 아미노산 서열로 배열될 때 아미노산 서열의 위치에 상응； 이때 뉴클레오타이드가 서열 번호 22 또는 서열 번호 23에 나타난 진균성 지질 분해 효소를 인코딩하는 뉴클레오타이드 서열과 적어도 90%의 동일성을 나타낼 때, 변형은 위치 63에서의 치환이 아니고 311-312 위치에서의 삭제가 아닌 것이다. 바람직하게는 뉴클레오타이드 서열은 서열 번호 1과 적어도 90%의 동일성을 나타낸다. 또한 본 발명은 방법에 따라 생성된 폴리펩타이드 및 신규한 핵산에 관한 것이다.
