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一种猪内源性逆转录病毒失活克隆猪的构建方法
- 专利权人:
- 云南农业大学
- 发明人:
- 魏红江,徐凯祥,赵红业,角德灵,郭建雄,赵恒,李鸿辉,卿玉波
- 申请号：
- CN201910497796.9
- 公开号：
- CN110295194A
- 申请日:
- 2019.10.06
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及一种猪内源性逆转录病毒失活克隆猪的构建方法,属动物生物技术领域。通过ddPCR和全基因组测序比对,确定猪内源性逆转录病毒在猪胎儿成纤维细胞基因组中的拷贝数和其占据染色体的位置,利用CRISPR/Cas9技术构建猪内源性逆转录病毒失活载体转染至猪胎儿成纤维细胞,筛选获得的阳性细胞进行体细胞核移植,待妊娠时取出胎儿鉴定其失活与否,利用ddPCR和全基因组测序比对后,再对该猪胎儿成纤维细胞进行基因打靶,依次循环,直至获得猪内源性逆转录病毒完全失活的细胞后进行体细胞核移植,最终获得猪内源性逆转录病毒完全失活的克隆猪。本发明克服了猪内源性逆转录病毒失活效率低、成功率低的问题,对解决异种器官移植的安全性问题具有重要的意义。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
