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利用双链RNA干扰技术制备降低烟草烟碱合成的抑制剂的方法及其应用
- 专利权人:
- 湖北中烟工业有限责任公司
- 发明人:
- 李琳,吴风光,张明月,王豹祥,何结望,邱立友
- 申请号:
- CN201210323441.6
- 公开号:
- CN102845476A
- 申请日:
- 2012.09.04
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 马辉
- 摘要:
- 本发明公开了一种利用双链RNA干扰技术制备降低烟草烟碱合成的抑制剂的方法及其应用,该方法先提取烟草的RNA,反转录得到烟草腐胺-N-甲基转移酶(PMT)基因的cDNA;然后利用PCR技术扩增该基因cDNA中的片断;然后连接在可表达RNA的质粒载体PET-21a中;将该质粒转入缺失RNAE3酶的大肠杆菌细胞中,表达发卡dsRNA;破碎细胞,得到dsRNA粗制剂,向dsRNA粗制剂中依次加入甘油、保护剂和分散剂,即可得到降低烟草烟碱合成的抑制剂。将得到抑制剂以5~15mL/株施于烟草上,降低烟草烟碱合成。本发明生产简便、成本低廉、对人畜和高等动物无害,适于在烟草上大量施用,具有广阔的产业化前景。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/