The invention relates to materials and methods of conjugating a water soluble polymer to an oxidized carbohydrate moiety of a therapeutic protein comprising contacting the oxidized carbohydrate moiety with an activated water soluble polymer under conditions that allow conjugation and analyzing the conjugation using 2D NMR analysis. More specifically, the present invention relates to the aforementioned materials and methods wherein the water soluble polymer contains an active aminooxy group and wherein an oxime or hydrazone linkage is formed between the oxidized carbohydrate moiety and the active aminooxy group on the water soluble polymer, and wherein the conjugation is carried out in the presence of a nucleophilic catalyst.본 발명은 컨쥬게이션시키는 조건 하에서, 산화된 탄수화물 모이어티를 활성화된 수용성 중합체와 접촉시키는 단계를 포함하는 치료적 단백질의 산화된 탄수화물 모이어티에 수용성 중합체를 컨쥬게이팅하는 물질 및 방법에 관한 것이다. 더 구체적으로는, 본 발명은 앞서 언급한 재료 및 방법에 관한 것이되, 상기 수용성 중합체는 활성 아미노옥시기를 함유하고, 옥심 또는 하이드라존 결합은 수용성 중합체 상에서 산화된 탄수화물 모이어티와 활성 아미노옥시기 간에 형성되며, 상기 컨쥬게이션은 친핵성 촉매의 존재에서 수행된다.
