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一种香菇病毒检测试剂盒及检测方法
- 专利权人:
- 中国科学院武汉病毒研究所;丽水市大山菇业研究开发有限公司;丽水市林业科学研究院
- 发明人:
- 张忠信,应国华,吕明亮,陈春乐,孙修炼,薛振文,李伶俐,姚立
- 申请号:
- CN201010145856.X
- 公开号:
- CN101812541B
- 申请日:
- 2010.04.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要:
- 本发明公开了一种香菇病毒检测试剂盒及检测方法,试剂盒包括:①食用真菌病毒RNA提取试剂;②RT-PCR检测试剂为:包括dNTPs 100μmol/L、Tris-HCl缓冲液、提取的RNA模板、无RNA酶去离子水、酶混合试剂和三对RT-PCR特异性引物;③对照样品包括阳性对照样品和阴性对照样品,试剂盒在-20℃以下的冰箱中保存。检测步骤是:A、从待测样品香菇菌丝体或子实体中提取总RNA;B、以提取的总RNA为模板,用设计的引物分别对RNA进行RT-PCR扩增;反应中使用的反转录酶为M-MLV反转录酶,DNA聚合酶使用Taq酶或高保真DNA聚合酶Pfu;C、取PCR反应液进行琼脂糖凝胶电泳,判断样品。本发明检测灵敏度高,结果准确,早期对香菇病毒进行快速、灵敏、准确的检测,大大减少了香菇生产中病毒病造成的危害。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/