本发明公开了一种耐热细胞溶解素及其在烟草薄片制备工艺中的应用。所述的细胞溶解素是将SEQ ID NO.1所示的耐热细胞溶解素基因克隆到大肠杆菌中，再通过蓝白斑筛选含有该耐热细胞溶解素基因的阳性克隆子，最后对阳性克隆子进行诱导表达，即得。本发明的细胞溶解素在高温条件下仍然具有极高的活性，其最适活性温度为50‑85℃，适应于烟草原料浸提的高温工艺，能够用于协助制备烟草薄片，提高浸提效率。实验结果表明，本发明的细胞溶解素参与到烟草三次浸提和打浆过程中，能够使薄片制备过程中的浸提液中蛋白质含量降低、可溶性总糖增加；制备成型的薄片经过检测后木质素含量有所减少，通过评析后烟草香味物质增加，杂气减少。
