The present invention is directed to a humanized CD19 single-chain variable fragment (scFv), comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8. The present invention is also directed to a CD19 chimeric antigen receptor fusion protein comprising from N-terminus to C-terminus: (i) a single-chain variable fragment (scFv) of the present invention, (ii) a transmembrane domain, (iii) at least one co-stimulatory domains, and (iv) an activating domain. The humanized anti-CD19 scFv of the present invention exhibits selective and high-affinity binding to CD19. CD19-CAR T cells based on humanized scFv of the present invention are useful to treat patients with B-cell malignancies including leukemia and lymphomas.La présente invention concerne un fragment variable à chaîne simple CD19 humanisé (scFv), comprenant la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 8. La présente invention concerne en outre une protéine de fusion de type récepteur antigénique chimérique CD19 comprenant, de l'extrémité N-terminale à l'extrémité C-terminale : (i) un fragment variable à chaîne unique (scFv) selon la présente invention, (ii) un domaine transmembranaire, (iii) au moins un domaine de costimulation et (iv) un domaine d'activation. Le scFv anti-CD19 humanisé selon la présente invention a une liaison sélective et à haute affinité à CD19. Les cellules CAR-T CD19 à base de scFv humanisé selon la présente invention sont utiles pour traiter des patients atteints de malignités à cellules B, notamment une leucémie et des lymphomes.