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利用毕赤酵母表达系统生产猪圆环病毒2型衣壳蛋白颗粒样疫苗的方法
- 专利权人:
- 北京伟嘉人生物技术有限公司
- 发明人:
- 文贤子,张志刚,杜恩岐,廖峰
- 申请号：
- CN201210011758.6
- 公开号：
- CN103169961A
- 申请日:
- 2012.01.16
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明提供了生产猪圆环病毒2型衣壳蛋白Cap颗粒样疫苗的方法，该方法以GenBank中PCV2-TJ毒株基因序列为模板，运用常规PCR方法扩增得到PCV-2衣壳蛋白Cap的成熟编码序列。将此基因与毕赤酵母分泌型表达载体pP-secSUMO3连接，构建pP-secSUMO3-Cap重组质粒，并用热激法转化大肠杆菌JM109进行扩增。阳性重组质粒经纯化处理后用BioRad公司电转仪电转化毕赤酵母菌株GS115。抗生素ZeocinTm浓度梯度筛选高拷贝菌株，分别提取这些高拷贝菌株的基因组DNA，以此为模板做PCR反应鉴定阳性克隆。通过仔猪攻毒试验，验证该颗粒样疫苗具有良好的免疫保护作用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
