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一种用于检测土壤中烟草黑胫病菌的方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院烟草研究所
- 发明人:
- 张成省,阚光锋,张玉芹,王晓飞,孔凡玉,王静,冯超,王新伟,李霞,陈雪
- 申请号:
- CN201110402300.9
- 公开号:
- CN102399896A
- 申请日:
- 2011.12.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明属于植物病虫害检疫领域,提供了一种用于检测土壤中烟草黑胫病菌的方法,对土壤中烟草黑胫病菌进行DNA提取以及分子检测,省去了传统分离培养的方法,在时间上大大缩短了检测周期,与普通PCR检测方法相比,无需后续的处理过程,并能对结果进行实时监测,设计引物是基于病原菌ITS的易变区域设计的,相近物种扩增时没有相应条带,特异性好,适于荧光定量PCR反应条件,土壤总DNA提取缓冲液加入了2%的PVP,有效地去除了土壤中部分杂质的污染,减少了对PCR效果的影响,提高了荧光定量PCR的检测灵敏度,同时荧光定量PCR的体系及反应条件根据所设计引物大小摸索条件所得,检测灵敏度高,可以达到2fg/μl。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/