The present invention relates to a method for mass-propagating NK cells, comprising the steps of: isolating lymphocytes from the peripheral blood of a specific volume (30-100 ml) allowable by single blood collection； transferring the isolated lymphocytes into a flask, followed by primary culturing in the presence of a composition for culturing immune cells； collecting only NK cells from the cultured immune cells, followed by secondary culturing in a flask； collecting the NK cells after the secondary culturing, followed by tertiary culturing in a flask having a larger volume than the flasks for the previous culturing； and collecting the NK cells after the tertiary culturing, followed by quaternary culturing in a large-volume flask. According to the present invention, the culturing was performed through four times of culturing after the isolation of the NK cells, and thus the NK cells can be propagated by 1000 fold or higher based on the initial count of NK cells. Further, there can be provided a composition for preventing and treating cancers, containing the propagated and cultured NK cells as an active ingredient. [Reference numerals] (AA) Before culture； (BB) After culture본 발명은, 1회 채혈 가능한 특정용량(30㎖ ~ 100㎖)의 말초혈액으로부터 말초혈액을 채취하여 림프구를 분리하는 단계； 분리된 림프구를 플라스크에 옮겨 면역세포 배양용 조성물 하에서 1차 배양하는 단계； 배양된 면역세포 중 NK세포만을 회수하여 플라스크에서 2차 배양하는 단계； 2차 배양 후 NK세포를 회수하여 이전의 배양에서보다 큰 용량의 플라스크에서 3차 배양하는 단계； 3차 배양 후 NK세포를 회수하여 대용량의 플라스크에서 4차 배양하는 단계를 포함하는 NK세포의 대량 증식 방법에 관한것으로, NK세포 분리 이후 4차의 배양으로 나누어 진행되며 NK세포를 초기 NK세포 수를 기준으로 1000배 이상 증식할 수 있고, 증식 배양된 NK세포를 유효활성성분으로 포함하는 암 예방 및 치료용 조성물로서 제공할 수 있다.
