本发明公开了一种苹果腐烂病抗性的离体鉴定方法。该方法包括以下步骤:(1)将苹果腐烂病菌(Valsa mali Miyabe et Yamada)的分生孢子在20-30℃培养6-24小时,得到萌发的分生孢子;(2)用步骤(1)萌发的分生孢子接种离体的树枝,在20-30℃,相对湿度为60-100%的条件下进行培养;培养5-16天后取出枝条,进行抗性鉴定。本发明鉴定苹果腐烂病抗性的方法是根据植物抗病性研究进展和腐烂病发病特点,采用经过培养的处于萌发状态的孢子,侵染树枝,不仅符合腐烂病菌侵染的规律,而且致病力适中,发病均匀,可以较好的鉴定苹果品种对腐烂病的抗性,具有方便、快速、简单易行、结果可靠等优点。