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稳定表达T7 RNA聚合酶的ST细胞系及其构建方法和应用
专利权人:
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
发明人:
仇华吉,祁巧芬,孙元,李娜
申请号:
CN200810093214.2
公开号:
CN101285054A
申请日:
2008.04.23
申请国别(地区):
中国
年份:
2008
代理人:
孙皓晨`费碧华
摘要:
本发明公开了一株稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞系ST/T7,其微生物保藏号是:CGMCC No.2444。本发明将T7 RNA聚合酶基因插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,得到pIRES2-EGFP-T7,转染ST细胞,筛选得到稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞系ST/T7。通过RT-PCR检测,可以从ST/T7细胞系中扩增到T7 RNA聚合酶基因的转录产物,用含有T7启动子控制下的红色荧光蛋白基因的表达质粒转染该细胞系,可观察到红色荧光蛋白的表达。本发明ST/T7细胞系能反式提供T7 RNA聚合酶,可用于猪瘟病毒等一些正链RNA病毒的反向遗传操作,还可作为体外转录表达系统,用于研究基因的结构与功能。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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