本发明公开一种特异性快速检测柑橘僵化病病原的引物对及试剂盒与应用。该引物对是基于柑橘僵化病病原(Spiroplasma citri)的膜蛋白基因序列设计的特异性PCR引物对,其序列如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示。本发明能够特异性检测柑橘螺原体(Spiroplasma citri),无需进行螺原体的分离培养,可以直接从柑橘总DNA中检测病原。本发明检测灵敏度高,可检测低至10‑5ng/μL的柑橘总DNA中的螺原体。本发明检测耗时较短,经济适用,总体流程在3~4小时,单个样品的检测费用成本仅5~6元。