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甘蔗条螟蜕皮调节转录因子cDNA及其克隆方法与重组应用
- 专利权人:
- 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
- 发明人:
- 刘志昕,张雨良,张树珍,王健华,熊国如,余乃通,王俊刚
- 申请号:
- CN201210059617.1
- 公开号:
- CN102586259B
- 申请日:
- 2012.03.08
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 刘建芳
- 摘要:
- 本发明属于生物基因工程领域,甘蔗条螟蜕皮调节转录因子CsHR3具有SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的序列。本发明克隆方法是:从甘蔗条螟预蛹期幼虫中提取总RNA,反转录合成cDNA;根据不同鳞翅目昆虫蜕皮调节转录因子的保守序列设计简并引物,PCR扩增甘蔗条螟CsHR3基因的中间片段,再通过3’-RACE技术设计特异性引物,成功获得CsHR3基因1266bp片段。本发明采用细菌介导RNAi技术在RNaseⅢ缺陷型大肠杆菌HT115中表达dsRNA,获得具有生物活性的dsRNA,通过饲喂甘蔗条螟幼虫来沉默甘蔗条螟蜕皮调节转录因子CsHR3基因,使甘蔗条螟不能蜕皮或破坏其正常生长发育过程,从而用于甘蔗条螟害虫的生物防治;或者通过基因工程方法将甘蔗条螟蜕皮调节转录因子转入作物,获得具有抗虫能力的作物。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/