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一种中枢神经系统特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠的制备方法
专利权人:
中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所
发明人:
绳纪坡,邓继先,杨晓
申请号:
CN200410039590.5
公开号:
CN1559202A
申请日:
2004.02.18
申请国别(地区):
中国
年份:
2005
代理人:
摘要:
本发明涉及的制备方法包括利用从129sv小鼠基因组文库克隆得到的1.8kb的神经胶质细胞酸性蛋白(GFAP)基因的5’端调控序列,构建含有两个β球蛋白绝缘子、GFAP5’端调控区、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pGFAP-Cre-hGH。以显微注射的方法将7.6kb的转基因片段βglobin insulator-pGFAP-Cre-hGH引入191枚小鼠受精卵,其中176枚分别移植至8只假孕母鼠的输卵管中使其发育,共获得子代小鼠25只,经PCR和Southern杂交鉴定其中7只小鼠基因组上整合有Cre基因,整合率为28%。用整合有Cre基因的转基因小鼠与基因组上整合有LoxP位点和LacZ表达框的ROSA26鼠杂交,以检测Cre酶介导的重组及其活性和组织特异性。LacZ染色结果表明:GFAP-Cre转基因小鼠只在中枢神经系统中表达Cre重组酶并能在体内成功介导LoxP位点间的重组。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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