一种高效的木豆毛状根培养体系建立方法

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专利权人:

东北林业大学;王慧梅

发明人:

王慧梅,付玉杰,王文杰,祖元刚,曲丹,任洁

申请号：

CN201310190956.8

公开号：

CN104017822A

申请日:

2013.05.22

申请国别(地区):

中国

年份:

2014

代理人:

摘要：

本发明提供一种利用木豆无菌苗叶片进行外植体转化，建立木豆毛状根培养体系方法。本发明采用叶片为外植体,建立毛状根培养体系：叶片在1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L的培养基上预培养两天后进行菌液侵染，菌液浓度OD₆₀₀为0.6-0.8，侵染5-10min后转入1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L培养基上共培养3天，然后转入抑菌培养基1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+400mg/L羧苄青霉素，约一周左右便可形成毛状根。PCR检测证明外源基因已经转入到木豆毛状根中，转化率为60%。转化后毛状根在无激素培养基上生长速度非常快，一个月能增殖7-8倍。次生代谢产物含量高，芹菜素和染料木素含量分别为0.58mg/g(DW)和1.32mg/g(DW)，显著高于实生苗根中含量。本发明提供的培养简单、再生周期短、可持续获得木豆毛状根方法，可用于规模化培养木豆毛状根来提取有价值次生代谢产物，具有很好的应用前景。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/