本发明公开了一种载脂蛋白C-III抗原多肽,抗载脂蛋白C-III多克隆抗体的制备与应用,属于生物技术领域。本发明所述抗载脂蛋白C-III多克隆抗体是以氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽为免疫原,与卵白蛋白OVA偶联后免疫新西兰兔制备抗血清,并用NHS激活的琼脂糖树脂与本发明的载脂蛋白C-III抗原多肽偶联制备抗体亲和纯化填料,进行抗体亲和纯化,对纯化后的抗体进行ELISA、Western blot鉴定。鉴定结果表明该多克隆抗体可特异性识别人血浆中的载脂蛋白C-III,可用于高甘油三酯血症患者血浆中载脂蛋白C-III的检测,为高甘油三酯血症诊断提供帮助,并能指导其临床预后判断。