PURPOSE: A novel preparation method for a decellularized amniotic membrane and use thereof are provided, which improve healing effect on cornea chemical burn. CONSTITUTION: A novel preparation method for a decellularized amniotic membrane comprises: a step of freezing amnion; a step of thawing the frozen amnion; and a step of centrifugally separating the thawed amnion. The amnion is selected among human, pig, sheep, goat, horse, alpaca, mouse, rat, or cow. The amnion is kept in the distilled water for 12-48 hours. The amnion is frozen at minus 80-200deg.C. The frozen amnion is thawed at 20-45deg.C.본 발명은 동결-해동-원심분리를 이용한 무세포 양막(decellularized amniotic membrane)의 제조방법에 관한 것이다. 발명의 무세포 양막은 무세포화 과정 이후에도 미처리 양막과 비교하여 70-140 wt%의 성장인자(예: bFGF)를 함유하여 각막 화학화상에서 이식 후 염증세포 및 아팝토시스 세포의 수를 감소시켜 염증반응 억제와 상처 치유, 반흔 억제에 매우 효과적이다. 따라서, 본 발명의 무세포 양막을 유효성분으로 포함하는 양막 이식용 조성물은 사람 양막의 임상학적 이용 상의 어려움을 극복(예를 들어, 구입의 용이성, 대량생산의 가능)할 수 있도록 한다.