本发明公开了一种猪葡萄球菌4种脱落毒素分型(EXHA、EXHB、EXHC和EXHD)的多重荧光PCR方法及试剂盒,属于多重荧光PCR方法及试剂盒领域。本发明的方法采用了序列如SEQ ID NO:1-8所示的引物,还采用了序列如SEQ ID NO:9-12所示的Taqman探针。本发明还提供了猪葡萄球菌脱落毒素EXHA、EXHB、EXHC和EXHD多重荧光PCR检测试剂盒,该试剂盒包含上述引物和Taqman探针,还包括DNA聚合酶;PCR缓冲液;dNTP和水。本发明的试剂盒具有特异性强、灵敏度高、快速、操作方便、节约耗材、成本低廉等优点,可用于猪葡萄球菌4种脱落毒素的检测,用于科研及临床应用。