一种利用RNA干涉技术降低曼地亚红豆杉细胞C-14位氧化紫杉烷含量的方法

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专利权人:

中国林业科学研究院林业研究所

发明人:

邱德有,李凤岚,胡新玲

申请号：

CN200910000834.1

公开号：

CN101781647A

申请日:

2009.01.19

申请国别(地区):

中国

年份:

2010

代理人:

摘要：

本发明涉及一种有效降低曼地亚红豆杉(Taxus x media)细胞合成C-14位氧化紫杉烷(C-14 oxygenated taxoids)的方法，属于基因工程的技术领域，是通过根癌农杆菌介导的双元载体转化系统将针对红豆杉紫杉烷14β羟基化酶基因(简称14OH)片段构建的RNA干涉载体导入到曼地亚红豆杉(Taxus x media)培养细胞中。利用优化的转化方法成功地获得了转基因细胞。PCR-Southern杂交、RT-PCR基因表达分析和化学成分检测结果显示：曼地亚红豆杉细胞转基因试验取得成功，转基因细胞系中14OH基因mRNA表达水平发生显著地下降。本发明显著抑制了曼地亚红豆杉细胞向C-14位氧化紫杉烷的流向，有望使代谢流向包括抗癌药物紫杉醇(taxol)和及其前体巴可亭III(baccatin III)在内的C-13位氧化紫杉烷(C-13oxygenated taxoids)，从而为提高紫杉醇的生物合成产量提供一条新方法。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/