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一种高效的农杆菌介导的铁皮石斛遗传转化方法
- 专利权人:
- 四川农业大学
- 发明人:
- 田孟良,陈稷,刘晨,王丽,黄进,刘帆,梁欢
- 申请号:
- CN201710669981.2
- 公开号:
- CN107227313A
- 申请日:
- 2017.08.08
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 何凡
- 摘要:
- 本发明提供了一种高效的农杆菌介导的铁皮石斛遗传转化方法,包括以下步骤:(1)农杆菌的活化培养;(2)浸染液的制备:将步骤(1)所得菌体加入MS液体培养基中,置于冰上使菌体完全溶于培养基中,再用MS液体培养基调节菌液至OD600=0.4‑0.8,然后加入100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和0.001%‑0.01%Triton‑100,摇匀;(3)超声处理与浸染:280‑320W,36‑45KHz条件下超声处理1‑3min;(4)共培养;(5)筛选;(6)植株再生。该转化系统完善,铁皮石斛原球茎的存活率高,经过各步骤及参数的优化,转化得到优良的抗性植株且转化率高,阳性转化率高达69.7%。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/