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一种DNA分子克隆方法及其应用
- 专利权人:
- 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
- 发明人:
- 言普,周鹏,沈文涛,庹德财,黎小瑛
- 申请号：
- CN201710222909.5
- 公开号：
- CN106906232A
- 申请日:
- 2017.04.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 陈欢`吴燕梅
- 摘要：
- 本发明公开了一种DNA分子克隆方法及其应用，所述方法包括以下步骤：获得入门载体含有ccdB基因，ccdB基因两端分别依次连接XcmI酶切位点、接头序列和SfiI酶切位点；获得表达载体含有ccdB基因，ccdB基因两端分别依次连接SfiI酶切位点和接头序列；通过PCR获得目标DNA，通过TA克隆插入到所述入门载体，获得入门克隆；或在PCR过程中通过引物加入相应的接头序列，获得线性PCR产物；将上述入门克隆或线性PCR产物与表达载体混合，在克隆反应液作用下完成克隆。本发明改进了克隆反应液以及入门载体和表达载体的结构，实现单个或多个线性PCR产物或环状质粒上的DNA在克隆反应液作用下直接克隆到环状目标载体的一个或多个部位，提高了克隆效率，可广泛用于各种类型的DNA分子克隆。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
