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一种对水产养殖环境沉积物中厌氧氨氧化细菌进行定量的方法
专利权人:
中国石油大学(华东)
发明人:
李静,耿春香,孙秀会
申请号:
CN201210461944.X
公开号:
CN102925581B
申请日:
2012.11.15
申请国别(地区):
中国
年份:
2014
代理人:
王连君
摘要:
本发明涉及一种利用实时荧光定量PCR技术对水产养殖环境沉积物中厌氧氨氧化细菌进行定量的方法,属于环境微生物生态学领域。所述方法包括:沉积物样品DNA的提取和定量,肼氧化还原酶HZO基因特异性引物的PCR扩增,标准质粒的构建,荧光定量PCR扩增和标准曲线的制作。根据检测到的样品Ct值对照标准曲线计算样品中厌氧氨氧化细菌的数量,得到的初始模板基因拷贝数的对数值与Ct值有较好的线性关系,回归系数大于0.99。本发明使用肼氧化还原酶HZO基因对厌氧条件下的氨氧化细菌进行定量分析,克服了现有方法使用16S rRNA基因进行定量的特异性不强、覆盖率低、不准确等缺点,提供了一种高特异性、快速、准确的检测水产养殖环境沉积物中厌氧氨氧化细菌数量的方法。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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