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一种对水产养殖环境沉积物中厌氧氨氧化细菌进行定量的方法
- 专利权人:
- 中国石油大学(华东)
- 发明人:
- 李静,耿春香,孙秀会
- 申请号:
- CN201210461944.X
- 公开号:
- CN102925581B
- 申请日:
- 2012.11.15
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 王连君
- 摘要:
- 本发明涉及一种利用实时荧光定量PCR技术对水产养殖环境沉积物中厌氧氨氧化细菌进行定量的方法,属于环境微生物生态学领域。所述方法包括:沉积物样品DNA的提取和定量,肼氧化还原酶HZO基因特异性引物的PCR扩增,标准质粒的构建,荧光定量PCR扩增和标准曲线的制作。根据检测到的样品Ct值对照标准曲线计算样品中厌氧氨氧化细菌的数量,得到的初始模板基因拷贝数的对数值与Ct值有较好的线性关系,回归系数大于0.99。本发明使用肼氧化还原酶HZO基因对厌氧条件下的氨氧化细菌进行定量分析,克服了现有方法使用16S rRNA基因进行定量的特异性不强、覆盖率低、不准确等缺点,提供了一种高特异性、快速、准确的检测水产养殖环境沉积物中厌氧氨氧化细菌数量的方法。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/