PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for concentrating PUFA (polyunsaturated fatty acid), particularly DHA (docosahexaenoic acid), EPA (eicosapentaenoic acid), or the like, contained in stock oil.SOLUTION: A method for producing PUFA concentrated oil includes processes for subjecting fat and oil containing PUFA as fatty acid that composes the fat and oil, to a hydrolysis reaction by a lipase, and separating a glyceride fraction with PUFA concentrated, wherein one of calcium hydroxide, magnesium chloride, ammonium sulfate, calcium carbonate, potassium dihydrogen phosphate and ammonium chloride is added as a reaction additive of the hydrolysis reaction by the lipase.COPYRIGHT: (C)2013,JPO&INPIT【課題】原料油中に含まれるPUFA、特にDHA、EPA等を濃縮する方法を提供する。【解決手段】油脂を構成する脂肪酸としてPUFAを含有する油脂をリパーゼによる加水分解反応に付す工程、および、PUFAが濃縮されたグリセリド画分を分離する工程、を含むPUFA濃縮油の製造方法において、リパーゼによる加水分解反応の反応添加物として水酸化カルシウム、塩化マグネシウム、硫酸アンモニウム、炭酸カルシウム、リン酸二水素カリウム、塩化アンモニウムのいずれかを添加することを特徴とする方法である。【選択図】 図4