The present invention relates to methods for developing engineered T-cells for immunotherapy that are non-alloreactive. The present invention relates to methods for modifying T-cells by inactivating both genes encoding T-cell receptor and an immune checkpoint gene to unleash the potential of the immune response. This method involves the use of specific rare cutting endonucleases, in particular TALE-nucleases (TAL effector endonuclease) and polynucleotides encoding such polypeptides, to precisely target a selection of key genes in T-cells, which are available from donors or from culture of primary cells. The invention opens the way to standard and affordable adoptive immunotherapy strategies for treating cancer and viral infections.Винахід стосується химерного антигенного рецептору, специфічного до CD19, що містить щонайменше один позаклітинний лігандзв'язувальний домен, трансмембранний домен і щонайменше один внутрішньоклітинний сигнальний домен, де вказаний позаклітинний домен містить одноланцюговий FV фрагмент, одержаний з моноклонального антитіла 4G7, специфічного до CD19, вказаний одноланцюговий FV фрагмент містить варіабельну ділянку важкого гамма 1-ланцюга імуноглобуліну моноклонального антитіла до CD19 4G7. Винахід також стосується полінуклеотиду, що кодує химерний антигенний рецептор, вектору експресії； генетично сконструйованої імунної клітини； способу конструювання імунної клітини； способу лікування В-клітинної лімфоми або лейкозу з використання вказаного химерного антигенного рецептору.
