本发明公开了一种提高哺乳动物细胞中外源基因表达水平的基因片段,其特征在于:其核苷酸如SEQ ID NO.1或2所示。本发明还公开了一种重组质粒,它是将pcDNA3.1(+)质粒中启动子CMV替换为CHEF‑alpha基因5’端的长度为1543bp序列,以及BGHPA替换为CHEF‑alpha基因3’端的长度为610bp序列,在启动子上游插入鸡溶菌酶MAR序列,筛选标记基因Neo替换为DHFR基因的重组质粒。本发明还公开了重组质粒的用途。本发明重组质粒携带外源基因转染哺乳细胞,外源基因的表达水平高,且外源基因的表达水平可以持续稳定高产,应用前景良好。