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基于ARMS‑PCR法检测BMP3和NDRG4基因甲基化的荧光PCR方法、试剂盒及体系
- 专利权人:
- 人和未来生物科技（长沙）有限公司
- 发明人:
- 黄临迷,宋卓,袁梦兮
- 申请号：
- CN201710090789.8
- 公开号：
- CN106978481A
- 申请日:
- 2017.02.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 孙银行`彭家恩
- 摘要：
- 本发明公开了一种基于ARMS‑PCR法检测BMP3和NDRG4基因甲基化的荧光PCR方法、试剂盒及体系。方法包括：(a)对含有BMP3和NDRG4基因的DNA材料中的CpG位点进行转换处理，使得未甲基化的CpG位点转换为UpG；(b)以转换处理后的DNA材料作为模板进行荧光PCR反应，荧光PCR体系中包括：用于检测BMP3基因甲基化的特异性引物及其探针序列，用于检测NDRG4基因甲基化的特异性引物及其探针序列，Taq酶、UNG酶、dNTPs、dUTP、Mg2+和PCR缓冲液，第一添加剂和第二添加剂，其中第一添加剂包括牛血清白蛋白，第二添加剂包括二甲基亚砜、NH4Cl和山梨糖醇水溶液。本发明的方法能够避免1个CpG位点甲基化代表整个基因甲基化水平的假阳性现象；甲基化水平检测限低至0.1～1％，灵敏度高。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
