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一种胚胎显微注射siRNA完全沉默目的基因的方法
- 专利权人:
- 黑龙江省农业科学院畜牧研究所
- 发明人:
- 郭镇华,吕蕾,赛福,杨云春,付博,刘自广,汪亮,彭福刚
- 申请号:
- CN201610717419.8
- 公开号:
- CN106350542A
- 申请日:
- 2016.08.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 赵永强
- 摘要:
- 本发明公开了一种胚胎显微注射siRNA完全沉默目的基因的方法,包括以下步骤;S1:将受精6h之后的卵母细胞移出,转入含有透明质酸酶的脱卵丘液中,静置1min;S2:将卵母细胞转移至显微镜下,脱去卵母细胞中的颗粒细胞,将去除颗粒细胞的卵母细胞用卵母细胞洗涤液清洗3次;S3:用注射针吸取20pl目标液体,并在显微镜下将注射针的针头刺入卵母细胞中,抽吸卵母细胞,使卵母细胞的细胞膜破坏,卵母细胞的细胞膜破坏完成后再快速注入目标液体,注射成功的标志是显微镜下可以观察到胚胎内容物扩张,即完成一个卵母细胞的注射。本发明提供的胚胎显微注射的方法,能够确保胚胎显微注射的成功率达到100%,使siRNA完全沉默目的基因。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/