CHATTERJEE, Pranam,JAKIMO, Noah, Michael,JACOBSON, Joseph, M.,NIP, Lisa
申请号:
USUS2019/030958
公开号:
WO2019/217336A3
申请日:
2019.05.06
申请国别(地区):
US
年份:
2019
代理人:
摘要:
Applications of a Streptococcus Cas9 ortholog from Streptococcus macacae (Smac Cas9), possessing minimal adenine-rich PAM specificity, include an isolated Streptococcusmacacae Cas9 protein or transgene expression thereof, a CRISPR-associated DNA endonuclease with PAM interacting domain amino acid sequences that are at least 80% identical to that of the isolated Streptococcus macacae Cas9 protein, and an isolated, engineered Streptococcus pyogenes Cas9 (Spy Cas9) protein with a PID as either the PID amino acid composition of the isolated Streptococcus macacae Cas9 (Smac Cas9) protein or of a CRISPR-associated DNA endonuclease with PID amino acid sequences that are at least 80% identical to that of the isolated Streptococcus macacae Cas9 protein. A method for altering expression of at least one gene product employs Streptococcus macacae Cas9 endonucleases in complex with guide RNA, for specific recognition and activity on a DNA target immediately upstream of either an "NAA" or "NA" or "NAAN" PAM sequence.L'invention concerne des applications d'un orthologue de Cas9 de Streptococcus provenant de Streptococcus macacae (Smac Cas9), possédant une spécificité PAM riche en adénine minimale, qui comprennent une protéine Cas9 de Streptococcusmacacae isolée ou une expression transgénique de celle-ci, une endonucléase d'ADN associée à CRISPR avec des séquences d'acides aminés de domaine d'interaction PAM qui sont au moins 80 % identiques à celles de la protéine Cas9 de Streptococcus macacae isolée, et une protéine Cas9 de Streptococcus pyogenes (Spy Cas9) isolée et génétiquement modifiée avec un PID sous la forme soit d'une composition d'acide aminé PID de la protéine Cas9 de Streptococcus macacae (Smac Cas9) isolée soit d'une endonucléase d'ADN associée à CRISPR avec des séquences d'acides aminés de type PID qui sont au moins 80 % identiques à celles de la protéine Cas9 de Streptococcus macacae isolée. L'invention concerne également un procédé pour modifier l'expression d'au m