一种与美洲南瓜抗白粉病生理小种2F基因紧密连锁的分子标记、引物及应用,属于分子标记技术领域。为了提高抗白粉病植株基因型选择的准确性以及育种过程的效率,本发明提供了一种与美洲南瓜抗白粉病生理小种2F基因紧密连锁的分子标记,所述分子标记为PM‑01或PM‑02;所述分子标记PM‑01由SEQ ID NO.1所示的313nt核苷酸片段和SEQ ID NO.2所示的313nt核苷酸片段组成;所述分子标记PM‑02由SEQ ID NO.3所示的249nt核苷酸片段和SEQ ID NO.4所示的249nt核苷酸片段组成。本发明,可以简便、快速地应用于白粉病抗病的分子标记辅助育种筛选体系。