Provided herein are methods for producing immune cells with disruption of multiple genes. Further provided are methods for inserting a chimeric antigen receptor at a gene locus of an immune cell.L'invention concerne des procédés de production de cellules immunitaires avec interruption de multiples gènes. L'invention concerne en outre des procédés d'insertion d'un récepteur d'antigène chimère au niveau d'un locus de gène d'une cellule immunitaire.