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特异性沉默鸡马立克氏病病毒gI、gE基因的siRNA序列及其载体和应用
- 专利权人:
- 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
- 发明人:
- 王云峰,赵妍,石星明,崔红玉,刘长军,王玫
- 申请号:
- CN201110077313.3
- 公开号:
- CN102212520B
- 申请日:
- 2011.03.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 王旭
- 摘要:
- 本发明提供了一种能有效地特异性沉默鸡马立克氏病病毒(MDV)gI和gE的siRNA序列及其载体和在MDV基因治疗和制备基因工程疫苗中的应用。本发明使用http//www.ambion.com的靶位点筛选和设计工具,通过一步法PCR扩增含有禽源U6启动子的siRNA表达盒用于快速筛选出MDV gI和gE基因的干扰序列。根据siRNA对应的起始位点在gI和gE基因mRNA序列上的位置,分别命名为sigI735和sigE936。构建分别含有干扰序列的siRNA真核表达载体,提取纯化的质粒转染CEF细胞,可有效抑制MDV gI和gE基因的表达,并利用DF1、Vero、MDCK稳定细胞系进一步检测干扰序列抑制MDV gI和gE基因表达的效果。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/