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农杆菌介导的活体幼胚转化获得转基因棉花的方法
- 专利权人:
- 陕西师范大学
- 发明人:
- 俞嘉宁,蔡云巧
- 申请号:
- CN201510148155.4
- 公开号:
- CN104726489A
- 申请日:
- 2015.03.31
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 申忠才
- 摘要:
- 一种农杆菌介导的活体幼胚转化获得转基因棉花的方法,由无菌胚剥离、制备转化液、震荡侵染、制备转基因棉花、转基因植株鉴定步骤组成。在无菌胚剥离中,将30%双氧水与无菌水配制成消毒液,棉种脱绒放入消毒液中,25℃、浸泡24小时,取出种子放在培养皿内,切掉种皮和1/3~1/2子叶,剩余的棉花胚放入含有基础培养基的培养皿中,让棉花胚受伤;在制备转化液步骤中,诱导液由乙酰丁香酮与硫酸镁制成,乙酰丁香酮能够诱导农杆菌Vir基因活化,提高外源基因整合的效率;在震荡侵染步骤中,转化液中加入Silwet L-77和MS液体培养基,使农杆菌更大范围覆盖在棉花胚上。本发明具有易于筛选、棉花的生长周期短、易于操作、转化效率等优点。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/