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一种猪脑心肌炎病毒HB10株感染性克隆质粒
- 专利权人:
- 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
- 发明人:
- 翁长江,崔尚金,黄丽,李江南
- 申请号：
- CN201410330789.7
- 公开号：
- CN104232668A
- 申请日:
- 2014.07.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 汤东凤
- 摘要：
- 本发明提供了一种猪脑心肌炎病毒HB10株感染性克隆质粒及其构建方法与应用，提供人工合成5′UTR和3′UTR序列并在中间加入多克隆位点(MCS)的方法，得到中间质粒pOK12-EMCV-5′UTR-MCS-3′UTR。本发明在合成EMCV5′UTR时，将polyC的碱基设定为15个。本发明利用设计的特异引物和特定的PCR反应条件，快速扩增EMCV基因组F1片段(6699bp)，并成功地连接到pOK12-5′UTR-MCS-3′UTR质粒，得到pOK12-rEMCV-H10B质粒，该cDNA感染性克隆质粒命名为pOK12-rEMCV-H10B。利用该质粒成功拯救出病毒-rEMCV-HB10，该拯救毒与母本病毒相比毒力减弱。利用EMCV-HB10的cDNA感染性克隆可以研究EMCV病毒致弱机理及开发EMCV低毒力的减毒疫苗。利用该病毒的cDNA感染性克隆为载体插入不同病毒保护性抗原基因，构建不同嵌合病毒，以及由此开发出双价或多价疫苗及其他可能的应用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
