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一种链霉菌基因组DNA大片段体内随机敲除的方法
- 专利权人:
- 南通大学
- 发明人:
- 路志群,邢述永,李文雪,邓自发
- 申请号：
- CN201410351442.0
- 公开号：
- CN104109688B
- 申请日:
- 2014.07.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 徐激波
- 摘要：
- 本发明公开了一种链霉菌基因组DNA大片段体内随机敲除的方法，包括：1）构建系列重组质粒pTNL_101、pTNL_103、pTNL_104、pTNL_105为第一个sceS酶切位点随机导入质粒；2）将所构建的重组质粒pTNL_101、pTNL_103、pTNL_104、pTNL_105导入天蓝色链霉菌M145，构建随机染色体大片段缺失的突变子库1；3）构建系列重组质粒pTNL_102为第二个sceS酶切位点随机导入质粒，导入突变子库1，获得突变子库2；4）R2YE平板筛选出大片段敲除突变子，精细定位染色体删除区段，并在出发菌株中进行定位敲除予以验证。本发明可以有效随机去除染色体区域可以去除的部分，目前定位结果表明敲除片段长度在2kb‑100kb之间，为改造链霉菌为抗生素异源表达宿主和底盘生物提供依据。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
