本发明提供了一种细胞表面展示有豆壳过氧化物酶的重组酵母菌及其构建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明通过设计如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,并将该序列化学合成后连接到pUC57‑simple载体上,然后亚克隆到pMIZY05v2表达载体上,构建重组载体pMIZY05v2‑oEp,经线性化后转化到解脂耶罗威亚酵母PO1h菌株中,得到可表面展示重组豆壳过氧化物酶的工程菌,然后在含有血红素的PPB培养基中培养2~5d,离心收集细胞即得固定化重组豆壳过氧化物酶。利用通过简单离心收集菌体即可得到重组豆壳过氧化物酶,可以省去过氧化酶繁琐的分离纯化步骤,简化生产工艺,降低生产成本。