本发明提供一种含D型脯氨酸和甘氨酸转角的β发卡抗菌肽及制备方法。本发明抗菌肽WKFpG其序列如SEQ ID No.1所示。本发明以刚性D‑Pro‑Gly转角为转角单元,通过在β‑发卡侧链的非氢键位点对称放置色氨酸和赖氨酸,利用其交互作用辅助D‑Pro‑Gly转角形成发卡结构,设计出抗菌肽模板XWYKYZZXWYKY‑NH2。本抗菌肽在制备治疗革兰氏阳性菌或/和革兰氏阴性菌引起的感染性疾病药物中的应用。本抗菌肽氨基酸序列长度仅有12,揭示刚性pG转角对于β‑发夹抗菌肽的生物学活性的影响,对多种革兰氏阴性菌和阳性菌具有高效的抑制作用,而且溶血活性较低,治疗指数达到110.30,相较于含有NG转角的相同侧链的β‑发卡抗菌肽提高了1.5倍,具有成为绿色高效抗生素替代品的发展潜力。